實驗原理 用抗-HBe包被固相載體后，同時加被檢血清和合適滴度中和試劑HBeAg，若被檢血清中含有抗-HBe，則與包被抗-HBe競爭結(jié)合HBeAg，被檢標(biāo)本中抗-HBe越多，HBeAg被結(jié)合越多，而與包被抗-HBe結(jié)合就越少，加底物后顯色就越淺；反之越深。 主要試劑與器材 elisa試劑盒：內(nèi)含已包被抗-HBe板條、HRP-抗HBe溶液、中和試劑HBeAg溶液、陽性和陰性對照血清，底物溶液（A液、B液）、終止液、洗滌液。 操作步驟 1.加樣：取出干包板條，按編號順序分別加50μl待檢血清、陰性對照血清和陽性對照血清于相應(yīng)孔中。設(shè)空白對照孔，除此孔外，每孔加HBeAg50μl、HRP-抗HBe50μl，振蕩混勻后，置43℃（或37℃）溫育1h。 2.洗滌：甩去孔內(nèi)液體，用洗滌液注滿各孔，靜置20s，甩干。如此重復(fù)洗滌4次，在吸水紙上拍干。 3.顯色：每孔加顯色劑A、顯色劑B各50μl，振蕩混勻后置37℃避光顯色10-15min。 4.終止：每孔加終止液50μl，振蕩混勻。 5.酶標(biāo)儀檢測：選用450nm波長，用空白孔調(diào)零之后測各孔OD值。 結(jié)果分析 P/N≤0.3為陽性。P/N＞0.3為陰性。 P/N=待檢血清OD值/陰性對照OD值。 注意事項 1.試劑置2-4℃保存。取用時應(yīng)先置室溫平衡。干包被板條須密封防潮，凍存，取用后余者及時封存。 2.恰當(dāng)選好HBeAg的濃度。 3.試劑用前應(yīng)搖勻。 | 
